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植物DNA快速纯化试剂盒（硅胶膜柱法）100次/盒

细胞分子试剂

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产品名称：植物DNA快速纯化试剂盒（硅胶膜柱法）英文名称：Plant gDNA purification kit（Silica membrane） 产品编号与包装规格： 编号    产品名称    规格TQ004D1 植物DNA快速纯化试剂盒（硅胶膜柱法） 100次/盒 产品简介：用于植物样本或真菌基因组DNA的小量提取。其原理是利用液氮研磨和热裂解相结合充分释放基因组DNA，用氯仿抽提使蛋白、多糖和未裂解部分沉淀，使用硅胶膜离心过滤可逆吸附基因组DNA，洗除蛋白质、脂质等杂质后，最后洗脱获得高纯度基因组DNA。使用本试剂盒提取的植物样本DNA可用于各种常规分子实验操作，包括酶切、PCR、分子杂交等实验。 储存条件及有效期：室温保存，有效期1年，若长时间不使用可放置2~8℃保存（储存过程中若溶液产生沉淀，使用前将其在室温放置一段时间或65℃条件下温育，待充分溶解后摇匀即可使用）。 样本类型：新鲜植物样本、真菌菌丝等。 植物DNA快速纯化试剂盒（硅胶膜柱法）试剂盒组成：<table cellspacing="0" cellpadding="0" width="608" style="width: 375px;"><tbody><tr class="firstRow"><td style="border:solid windowtext 1px;background:#DDDDDD;padding:0 0 0 0">序号</td><td style="border:solid windowtext 1px;border-left:none;background:#DDDDDD;padding:0 0 0 0">产品组成</td><td style="border:solid windowtext 1px;border-left:none;background:#DDDDDD;padding:0 0 0 0">规格</td></tr><tr><td style="border:solid windowtext 1px;border-top:none;padding:0 0 0 0">1</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">Buffer PLB</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">76mL</td></tr><tr><td style="border:solid windowtext 1px;border-top:none;padding:0 0 0 0">2</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">Buffer PBB</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">76mL</td></tr><tr><td style="border:solid windowtext 1px;border-top:none;padding:0 0 0 0">3</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">PW1</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">22mL(使用前加33mL无水乙醇)</td></tr><tr><td style="border:solid windowtext 1px;border-top:none;padding:0 0 0 0">4</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">PW2×2瓶</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">15mL/瓶(使用前每瓶加62mL无水乙醇)</td></tr><tr><td style="border:solid windowtext 1px;border-top:none;padding:0 0 0 0">5</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">Elution buffer</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">10mL</td></tr><tr><td style="border:solid windowtext 1px;border-top:none;padding:0 0 0 0">6</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">DNA硅胶膜吸附柱</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">100套</td></tr><tr><td style="border:solid windowtext 1px;border-top:none;padding:0 0 0 0">7</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">使用说明书</td><td style="border-top:none;border-left:none;border-bottom:solid windowtext 1px;border-right:solid windowtext 1px;padding:0 0 0 0">1 份</td></tr></tbody></table> 植物DNA快速纯化试剂盒（硅胶膜柱法）试剂盒使用方法： ● 初次使用前请在PW1和PW2中加入推荐量的无水乙醇，参见瓶身标签或使用说明书。研磨样品前可先将Buffer PLB放入65℃水浴锅预热。 1，用液氮把植物/真菌样品研磨成粉末，转移50~100 mg 新鲜/冻藏样品或15~40 mg干燥样品至1.5 mL离心管中； 2，立即吸取预热至65℃的Buffer PLB 700 μL至研磨后的样品中，剧烈涡旋使样品充分分散，65°C水浴15分钟，期间手动颠倒混匀3次；         注：处理复杂样品，如容易氧化褐变的样本，加入β-巯基乙醇(自配)至 Buffer PLB 中，终浓度为0.1%(V/V)，极难提样品可加至2%(V/V)，以提高裂解液的抗氧化能力。 3，加入700 µL氯仿至样品中，涡旋混匀10秒；         注：处理富含多酚或淀粉的植物/真菌组织，可在第3步前，用酚:氯仿=1:1 进行等体积抽提。 4，室温下，12,000×g离心5分钟，小心转移上清液至新离心管中；         注：若需彻底去除RNA，加入10 μL RNase A至上清液中，颠倒混匀，室温放置5~10分钟。 5，加入700 µL Buffer PBB 至上清中，颠倒混匀15次； 6，把DNA柱装在收集管中，转移一半体积混合液至柱子中，12,000×g离心1分钟。 7，倒弃滤液把柱子装回收集管，把剩余混合液转移至柱子中，12,000×g离心1分钟。 8，倒弃滤液把柱子装回收集管，加入500 µL Buffer PW1至柱子，12,000×g离心1分钟。 9，倒弃滤液把柱子装回收集管，加入700 µL Buffe PW2至柱子中，静置1分钟后12,000×g离心1分钟。 10，倒弃滤液把柱子装回收集管，加入700 µL Buffer PW2至柱子中，静置1分钟后12,000×g离心1分钟。 11，倒弃滤液把柱子装回收集管，12,000×g离心2分钟去除柱子中残留的乙醇。 12，将柱子转移至新的1.5 mL离心管中，加入50~100 µL预热到65°C Elution buffer至柱子的膜中央。室温静置4分钟，12,000×g离心1分钟。 ● 丢弃DNA结合柱，把得到的DNA溶液保存于-20℃。Elution buffer可用无菌去离子水替代，但pH值应在8.0~8.5。 ● 将Elution buffer预热到65℃使用，可提高基因组DNA得率。 ● 可将洗脱得到的溶液再次吸出滴加吸附柱中央，静置几分钟后再次离心收集可提高基因组DNA提取得率。 纯度及浓度检测分析： 1. 提取得到的真菌基因组DNA可用紫外分光光度计测量浓度与纯度。2. DNA在OD 260处有明显的吸收峰，在此条件下，1 OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50 μg/mL；单链DNA或RNA为40 μg/mL；寡核苷酸为20 μg/mL。3. OD260/280=1.7~1.9，如果A260/280≤1.7或比值过低，表示受到蛋白（芳香族）或酚类物质污染，需要纯化样品。若DNA样品中A260/280>2.0表明样品有RNA或DNA降解。4. Elution buffer使用去离子水时候，OD260/280会偏低，但不表示纯度低。 植物DNA快速纯化试剂盒（硅胶膜柱法）试剂盒使用注意事项： 1. 本试剂盒提取使用的器皿、移液器等均应为专用，离心管、枪头等一次性耗材需进行高压灭菌。操作人员应穿戴洁净工作服、口罩、帽子、使用一次性无粉手套。 2. 尽量使用新鲜样品，以降低基因组DNA的降解风险。 3. 加入PLB前应预热到65℃，以免影响提取效果。 4. 裂解液注意不要直接接触皮肤，如有接触请用大量清水冲洗。 5. 漂洗液使用后盖紧盖子，以免乙醇挥发影响抽提效果。 6. 如果基因组DNA需长期保存，建议使用Elution buffer洗脱，分装保存于-20℃或-80℃。 7. 请严格按照本说明书操作步骤进行，不同批号的试剂若无特殊说明，请勿混合使用，并保证在有效期内使用该试剂盒，因操作不当导致的基因组DNA提取效果不佳，本公司概不负责。 8. 妥善处理所有样本和试剂材料，彻底清洁和消毒操作台面。 参数图片如有变动，请以实际为主。

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